在实验1中,观察到压力侧牙周膜中的一些神经纤维在正畸力的作用下经历了损伤、变性然后增殖的过程。然而,正畸力作用下牙周膜中不同种类神经纤维的变化并不十分清楚。因此,本实验用透射电镜观察了大鼠牙齿移动过程中压力侧神经纤维的超微结构变化。
材料和方法
1实验设备
英子IB-5离子镀膜机(日本)
LKB-3超薄切片机(瑞典)
JEM—2000EX透射电子显微镜(日本)
2动物和团体
15只健康雄性SD大鼠(由我校实验动物中心提供)体重20020g,随机分为5组,正常对照组、牙齿移动2d组、1w组、2w组和3w组。动物饲养、模型制备和样品固定与实验1相同。将上颌放入5 u- 2Na的缓冲液中,在4的32下脱钙3周,取左上颌第一磨牙近中根近中根尖1/3大小的组织块,用电子显微镜按照石法33]染色,即1%四氧化锇固定1小时,然后用0.1摩尔/升磷酸缓冲液洗涤两次,再用10%单宁酸溶液室温浸泡1小时,以增强胶原纤维Epon812定向包埋,用LKB-3超薄切片机切片。切片用饱和醋酸铀和柠檬酸铅染色,用JEM—2000型透射电镜观察。
结果
1.动物条件与实验1相同。
2.控制组
透射电镜下,正常牙周膜中可见两种神经。一种是有髓神经纤维,横截面为圆形或椭圆形,被雪旺氏细胞形成的髓鞘所包围。轴突中可见大量排列的微丝、微管和分散的线粒体,溶酶体很少见到。雪旺氏细胞富含细胞质浆,内含粗面内质网和线粒体。细胞核呈扁圆形,染色质沿着核膜松散分布。髓样神经纤维根据其直径可分为粗有髓神经纤维(直径6m)和细有髓神经纤维(直径6m)。另一种是无髓神经纤维,位于有髓神经纤维之间的束中。直径一般小于1 m。线粒体、微管和微丝很少。它的轴突只被一层雪旺氏细胞鞘所包围。此外,在神经周围可以清楚地观察到成纤维细胞和胶原纤维的有序排列(图2-1)。
3.实验组
2d组可见部分粗有髓神经纤维髓鞘凹陷,髓鞘排列紊乱、断裂、分离、空泡、断裂,轴突可见少量内质网,线粒体明显肿胀,神经丝清晰,雪旺氏细胞和细有髓神经纤维无明显变化;细小无髓神经纤维略有增加,部分神经纤维肿胀,线粒体肿胀。也有一些粗糙的有髓神经纤维没有异常变化(图2-2)。
第1周组可见许多粗髓鞘神经纤维卷曲,结构不规则,部分髓鞘纤维分离、断裂、空泡化,部分髓鞘重叠,轴向突变变窄,部分髓鞘纤维断裂,散在于间质,神经纤维周围胶原纤维溶解结构不清(图2-3),细髓鞘神经纤维无明显变化,雪旺氏细胞正常。然而,精细无髓神经末梢的数量显著增加,并且结构没有显著改变,除了一些神经纤维被放大(图2-4)。
2w组粗有髓神经轴突出现线粒体肿胀、溶酶体形成、髓鞘单层脱落、空泡、髓鞘破裂和部分区域变薄。然而,一些有髓神经纤维的髓鞘轻度退化和溃烂,一些髓鞘单层分离,一些没有异常变化。对照组无髓神经纤维少于1周,无髓神经纤维数量恢复到对照组水平,部分无髓神经纤维凹陷、肿胀、形状不规则。神经纤维周围的胶原纤维被溶解,只剩下少量的胶原纤维。
在3w组中,一些粗髓鞘的结构
牙周膜感觉神经主要由有髓的A型神经纤维和无髓的[神经纤维组成。A型纤维根据其直径可分为A和A纤维[43]。勒舍尔[35]发现大多数有髓神经纤维位于猫犬牙周膜血管附近的神经束中,直径约为5m,属于纤维。约20%的有髓神经纤维直径大于6m,属于分散在牙周膜中的机械感受器纤维。无髓神经纤维分为粗无髓神经纤维和细无髓神经纤维。粗无髓神经纤维是纤维的鲁芬尼终末和分支。光镜下细无髓神经纤维显示游离神经末梢,为交感传入或侵入性传入。林登[认为自由神经末梢可能与机械感觉或伤害性感觉有关。实验结果与上述学者的观点一致。还观察到各种类型的神经纤维分布在牙周膜中。
2.正畸力作用下牙周神经纤维的变化
该实验清楚地表明,正畸力可以引起压力侧牙周膜中神经纤维的变化。压力侧牙周膜中的细小无髓神经纤维,即游离神经末梢,在第2天开始增殖,最明显的是在第1周,并在第2周后逐渐恢复正常。同时,可以观察到轻微的退化,这种退化在3周内还没有完全恢复。髓样神经纤维经历不同程度的变性,其中直径小于6m的A纤维轻微变性,而直径大于6m的A纤维严重变性,3W时尚未完全恢复。
关于正畸力作用下牙周神经纤维变化的研究,目前各学者的观察结果并不一致。通过镀银观察到牙周神经在损伤后有数量减少然后增殖的过程。斋藤[9]观察到牙齿移动后CGRP阳性神经的数量增加,而中本[10]发现CGRP阳性神经的数量减少。
2019-12-08
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